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FBS胎牛血清使用方法与注意事项
一、使用方法
储存:
常规储存温度为-20℃12。
如需长期保存,可置于-80℃,但需注意解冻时可能产生的沉淀问题。
解冻:
推荐从低温中取出后,先置于2-8℃冰箱中解冻(可过夜),再于室温下使其全部融解,过程中需不时摇动瓶身以混合均匀,减少沉淀产生。
避免直接从低温环境拿到25-37℃环境中解冻,以防产生絮状沉淀和影响血清中物质的活性。
分装:
解冻后的血清可按使用频率分装到无菌离心管中,并存放于-20℃或-80℃,以减少反复冻融对血清质量的影响。
使用:
根据实验需求添加适量血清到培养基中,常用浓度为10%,但具体浓度可能因细胞类型而异。
建议现用现配培养基,已配好的培养基应在一周内使用完成。
二、注意事项
避免反复冻融:
反复冻融会降低血清中的蛋白质和生长因子的稳定性,影响血清质量。
储存温度:
长时间储存在2-8℃可能导致血清中的蛋白和脂蛋白聚集形成沉淀,因此推荐在-20℃以下储存。
如需在4℃短期存放,请勿超过一个月。
沉淀处理:
血清中可能包含纤维蛋白和脂蛋白等正常沉淀,轻轻摇动并加热至37℃通常可使其再溶解。
如需去除沉淀,可采用离心方法,但不建议过滤,以免堵塞滤膜。
灭菌处理:
商品化胎牛血清在生产过程中已采取过滤灭菌步骤,通常无需额外灭菌处理,除非实验有特别要求。
选择优质血清:
根据实验需求选择合适的血清品牌,注意避免购买到假货或质量不佳的血清。
综上所述,正确使用和储存FBS胎牛血清对于细胞培养的成功至关重要。遵循上述方法和注意事项,将有助于确保实验结果的准确性和可靠性。
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