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使用胎牛血清的常见误区有哪些?
使用胎牛血清时常见的误区主要包括以下几点:
储存条件不当:
误区:将血清长时间储存在2-8℃环境中,或反复冻融。
正确做法:血清应长期保存在-20℃以下,避免反复冻融。若需频繁使用,可在4℃下短期保存(不超过一个月),但应尽快用完并避免污染。
解冻方法不正确:
误区:直接将血清从冷冻状态置于室温或高温水浴中快速解冻。
正确做法:推荐采用梯度融化方法,先将血清置于4℃冰箱中融解,或在室温下缓慢解冻,并规则地摇晃均匀。避免使用高温水浴快速解冻,以减少沉淀的产生。
处理絮状沉淀不当:
误区:认为絮状沉淀是有害的,必须过滤去除。
正确做法:絮状沉淀主要由纤维蛋白和脂蛋白组成,是正常现象,不影响血清质量。可以通过离心(如400g,1-2分钟)将沉淀沉至瓶底,然后小心地将上清液转移到另一个无菌瓶中。大多数情况下,轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。不建议使用过滤方法去除沉淀,因为可能会堵塞滤膜。
未考虑血清的适用性:
误区:盲目选择血清品牌,不考虑实验的具体需求和细胞的适应性。
正确做法:在选择血清时,应考虑实验的具体需求、细胞的生长特性和血清的来源、质量等因素。可以先提取一部分细胞进行试用,按照比例替换血清,以观察细胞的适应情况。
忽视无菌操作:
误区:在储存、解冻和使用血清过程中忽视无菌操作。
正确做法:整个操作过程应在无菌操作台中进行,注意无菌操作,以避免污染。
对血清灭活处理的理解不足:
误区:认为所有情况下都需要对血清进行灭活处理。
正确做法:血清灭活不是强制要求,客户可以自行选择是否进行。灭活条件为水浴温度56℃,30分钟。但需注意,灭活后的血清可能会出现沉淀变多的现象。溶液
通过避免这些常见误区,可以更有效地利用胎牛血清进行细胞培养,提高实验效果和数据准确性。
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